试述菌种真姬菇液体菌种生产试验设计

【摘 要】本文主要研究生产真姬菇液体菌种的几种培养基，并通过实验比较选择出了较合适真姬菇生长的1/2棉籽壳和1/2锯木屑的液体培养基。实验结果显示这两种培养基较其它液体培养基更利于真姬菇菌丝球的形成，而且上较经济，取材也方便，适用性较强，更易于推广。
【关键词】真姬菇；液体菌种；生产；培养基
前言及试验目的：
真姬菇又名玉蕈，因为它具有独特的蟹味而又名蟹味菇，它菇形怡人，质地脆嫩，营养分析表明它的蛋白质含量高于金针菇，8种人体必需氨基酸含量占测定的17种氨基酸总量的80%以上，越来越受到人们的重视。实践证明，固体菌种较液体菌种在生产和应用上有诸多不利因素。长期以来人们一直惯于用PDA固体培养基制备母种接原种，再用原种接栽培种，这样操作不便，费工费时不经济，菌丝生长速度慢，菌龄不一致，出菇不齐，不便于管理，保存时容易老化。虽然世界上已有50多种食用菌进行了液体发酵实验，但大都是对香菇、金针菇、平菇等进行的研究，由以上原因我们相对真姬菇液体菌种的生产做一小试，设制几种培养基，比较一下哪一种更适合真姬菇菌丝的生长。

一、材料设备

供试菌株：真姬菇、土豆、黄玉米渣、棉籽壳、锯木屑、葡萄糖、磷酸二氢钾7H20-硫酸镁，维生素B1
蒸汽消毒器、微生物多用培养箱、恒温振荡器、三角瓶；玻璃珠、托盘天平、抽滤装置、电炉。

二、培养基制作方法

我们一共送配了六种培养基，其中后五种是自己设制，每种培养基作为一个处理，每个处理实验重复10次。
配方：
（1）土豆玉米渣培养基：
将土豆去皮去芽切金桔大小200g置冷水中备用。
另取50g新鲜玉米渣于2000ml水中煮30分钟后用双层医用纱布过滤，滤液与200g土豆煮30分钟，双层纱布过滤，定容1L后加葡萄糖30g，磷酸二氢钾3g，MgSO4.7H2O1.5g、维生素B14mg，完全溶解分装于8个500ml三角瓶内，同时放入玻璃球15～20粒，PH自然，加面塞牛皮纸并用胶圈，系好在1.05Kg/cm2下灭菌36分钟，静置三天查五杂菌方可接种。
（2）材料通（1），只是在煮玉米渣和土豆时分别煮20分钟。其它处理同（1）
（3）棉籽壳土豆培养基：将50g玉米渣改用50g棉籽壳，其它同（1）一样
（4）1/2棉籽壳、1/2玉米渣、土豆培养基：将50g玉米渣改用为25g棉籽壳和25g玉米渣，其它同（1）（玉米渣、棉籽壳分别煮30分钟）
（5）锯木屑土豆培养基：将50g玉米渣改用为50g锯木屑，其它同（1）
（6）1/2锯木屑、1/2玉米渣土豆培养基：将50g玉米渣改用为25g玉米渣和25g锯木屑。分别煮30分钟，其它同（1）
三、接种
取新鲜试管种（25℃培养5-6天），接菌种红小豆大小5-6块于培养基内，最好刮菌丝漂浮于液面上静置48小时后上摇床。这里我们用了两种摇床：微生物多用培养箱（型号WPD）；恒温振荡器（型号TH8-82）。

四、培养（摇床上）

培养条件：温度：23～25℃ 其它：见下列数据

五、实验现象及结果分析

1.实验现象

数据如下：
（1）W源于：论文写法www.618jyw.com
PD 转速30 5天 由于培养基非常粘稠，培养数天后菌丝生长不好，无明显圆滑菌丝球，科技那菌丝连接体及一些菌丝片段；无菌丝 湿重4.41
（2）WPD 转速20 6天 菌丝生长不明显，也无明显菌丝球，可见一些菌丝片段； 无菌丝 湿重5.53
（3）WPD转速20 5天 培养液清澈，有一些菌丝集合体，但不是菌丝球。 无菌丝 湿重3.15
（4）TH8-82 转速50-60 4天 培养24小时后就出现菌丝球，直径较大3-4mm，菌丝球便秘那光滑且均匀，有小突起形似小杨梅，且每天直径都在增加，4天后直径打6-6.5mm，而且培养液内还有血多菌丝片断有几个菌丝球很大达1cm 菌丝25 湿重4.25
（5）TH8-82 转速60 3天 培养过程中无胆量菌丝球出现，可见一些菌丝连合体，并且出现几粒特大直径菌丝球 无菌丝 湿重3.8
（6）TH8-82 转速60 3天 摇床培养24小时后出现大量菌丝球，还有一些菌丝断片，菌丝球大小均匀一致，表面有小突起直径1～3mm，培养液清澈透明 菌丝86 湿重4.18

2.结果分析

由以上数据我们可以看出以下几点：
①（4）（6）菌丝球长势良好，且湿重即生物产量相当。
②从培养天数看（4）（6）培养三或四天即可以长出大量菌丝球，可见，在这一点上也较其它液体菌种经济。

六、收获与体会

通过这次实验，激发了我们对生物研究的兴趣，在实验过程中，我们学到了设计实验、进行观察的基本方法，提高了实验观察技能和数据记录能力。我们在老师的帮助下进行的结果分析也让我们学到了如何从现象中去得出结论，掌握了一些科学研究方法，克服了急躁情绪，为今后的生物系列实验的开展打下了基础。
参考文献：
张引芳，王镭.蟹味菇的生物学特性及其栽培技术.食用菌，1992 14（3）
李长喜，赵斌清，王文成.真姬菇生理特性的试验研究.中国食用菌，1999（2）
[3]李志超，杨珊珊，李宜丰.征集故、金针菇、草菇栽培技术.陕西科技出版社，1993